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彗星實(shí)驗(yàn)?zāi)z電泳
彗星實(shí)驗(yàn)?zāi)z電泳

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背景: 單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)(SCGE)又稱彗星試驗(yàn)(comet assay)

其原理是:當(dāng)各種內(nèi)外源DNA損傷因子誘發(fā)細(xì)胞DNA鏈斷裂時(shí),DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞,在細(xì)胞裂解液作用下,細(xì)胞膜、核膜等膜結(jié)構(gòu)受到破壞,細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、RNA以及其它成分均擴(kuò)散到細(xì)胞裂解液中,而核DNA由于分子量太大只能留在原位。在中性條件時(shí),DNA片段可進(jìn)入凝膠發(fā)生遷移,而在堿處理和堿性電解質(zhì)的作用下,DNA發(fā)生解螺旋,損傷的DNA斷鏈及片段被釋放出來(lái),由于這些DNA的分子量很小,所以在電泳過(guò)程中會(huì)離開(kāi)核DNA向陽(yáng)極移動(dòng),形成彗星狀的圖像,而未損傷的DNA部分保持球形。DNA受損越嚴(yán)重,產(chǎn)生的斷片越多并且片段越小,電泳時(shí)遷移的DNA量也就越大,遷移距離越長(zhǎng),熒光顯微鏡下可觀察到尾長(zhǎng)增加、尾部熒光強(qiáng)度增強(qiáng)。在一定條件下,DNA遷移距離(彗星尾長(zhǎng))和DNA含量(熒光強(qiáng)度)分布與DNA損傷程度呈線性相關(guān),因此,尾矩(尾部DNA的含量與尾長(zhǎng)的乘積)成為定量測(cè)定單個(gè)細(xì)胞DNA損傷程度的主要依據(jù)。

技術(shù)參數(shù):

系統(tǒng)尺寸 (W x L x H) 31 x 47.5 x 6.5cm

有效槽面積 (W x L x H) 27.5 x 37 x 3.5cm

建議緩沖液容量ml 800

載玻片容量 (25 x 75mm; W x L) 40

建議使用環(huán)境 5V/cm (300mA) 5V/cm (300mA)

輸出電源連接口徑mm 4

建議電源 EV261 600 Volts, 1000 mAmps, 300 Watts

主要特點(diǎn):

1 低溫:可外接制冷裝置,將溫度控制在4℃。也可利用冰塊控溫

中心冷卻平臺(tái):提供方便的可以放置載玻片的中心冷卻平臺(tái)

2 遮光:不透明的丙烯酸電泳槽主體

3 高通量:可以做40片載玻片(75*25cm)

該儀器需配套電源EV261以及冷卻水循環(huán)系統(tǒng)FL300 使用

電源EV261

輸出范圍:0-600V/1V 0-1000mA/1mA 0-300W/1W

四組輸出插孔

冷卻水循環(huán)系統(tǒng) FL300

工作溫度范圍:-20℃---40℃

泵容量:壓力(350mbar) 流量(15L/min)

體積:25*50*60cm

顯示:LED顯示

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