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電穿孔專家 —— 專業(yè)鑄就經(jīng)典

美國BTX公司自1983年成立以來，以電穿孔儀、電融合儀為主要產(chǎn)品，是**家生產(chǎn)高質(zhì)量電穿孔儀器的生產(chǎn)廠家，開創(chuàng)了許多在電穿孔、電融合、轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)化等方面的**產(chǎn)品和技術(shù)，不僅為全球在此領(lǐng)域的研究者提供了BTX專業(yè)產(chǎn)品，而且擁有多至25種的配件，包括：電穿孔、電融合、活體導(dǎo)入配件等等，成為全球**專業(yè)的轉(zhuǎn)基因、電融合、活體轉(zhuǎn)基因儀及配件的生產(chǎn)廠家。

ECM® 399 是一款指數(shù)衰減波電穿孔系統(tǒng)，其提供的電場強度和脈沖強度是專為細菌和酵母的簡單轉(zhuǎn)化而設(shè)計的。在低壓模式中，ECM®399也可以運用于部分哺乳動物細胞實驗，是科研和教學(xué)中基本轉(zhuǎn)化實驗的理想選擇，操作簡單，易學(xué)易用（開機、設(shè)定電壓、放電），經(jīng)濟實惠，一體化設(shè)計，便于攜帶。

可操作性 高、低壓模式，電壓精確可調(diào)

監(jiān)控顯示 液晶屏幕高分辨率顯示電壓峰值、儀器狀態(tài)

安全性能 電弧淬滅功能，短路保護。

兼容性 PEP，安全臺，35mm培養(yǎng)皿電極

一、 儀器的安全性注意事項

1. 在工作場所提供合適的電源座，位置**遠離有水環(huán)境，忌在爆炸物或在可傳導(dǎo)的污染環(huán)境里工作。

2. 由于儀器是熱啟動裝置，在夏天開機后需預(yù)熱20min以蒸發(fā)內(nèi)部水蒸氣，且在每次使用完畢后將電源開關(guān)及電源線拔掉以確保安全。

3. 一個人操作儀器以避免不協(xié)同對儀器造成損壞。

4. 操作儀器前，將樣品完全準備之后再連接線路以及開機。

5. 操作池蓋合上才可以操作，忌輕易觸摸內(nèi)部金屬片。

二、 試驗操作安全性

實驗操作過程中不可避免會出現(xiàn)擊穿現(xiàn)象，會對儀器造成很大損傷，原因有很多。為較好地維護儀器，每次實驗時可先用空樣品（只有緩沖液）進行試打，以檢驗儀器安全性和所用緩沖液的純度，如發(fā)現(xiàn)有電穿情況要立刻停止操作分析原因在進行試驗。

電爆現(xiàn)象：初始設(shè)置參數(shù)與反饋參數(shù)不一致，反饋值都會很大幅度的降低。

發(fā)生電穿的可能原因：

1. 設(shè)置參數(shù)出現(xiàn)錯誤：場強與電壓的關(guān)系，公司提供的參考數(shù)據(jù)是場強需經(jīng)換算。

　 Ｅ＝ｖ／ｃ（ｃ為電極杯的間隙）

2. 操作池內(nèi)部要始終保持干燥。

3. 如果公司提供的步驟上要求要達到某種冷凍溫度和時間一定要按要求進行。

4. 電極杯和緩沖液**不要有雜質(zhì)。（主要來自電解質(zhì)的污染）

5. 電極杯在使用之前要洗滌干凈，使用時間太長則需要及時丟棄。

6. 兩次操作時間間隔**大于１min，以確保儀器良好散熱。

高電壓警告：為了實際操作和安全的原因，ECM 399在施加脈沖的過程中，請不要接觸任何電纜或電極連接處，當(dāng)需要連接或拆下電纜時，要檢查系統(tǒng)不在操作中或處于備用狀態(tài)。

試驗操作中一些細節(jié)：

電極杯清洗流程：

電擊使用之前：

1．用滅菌超純水將電極杯反復(fù)清洗兩次（盡量接觸到杯內(nèi)間隙，包括杯蓋）

2．向電極杯中加入電擊緩沖液清洗兩次

3. 棄去清洗液（甩盡液體），置于超凈臺中紫外滅菌30min，待時間結(jié)束后則可進行試驗操作（電極杯蓋好蓋子置于冰上等待試驗用細胞）

電擊結(jié)束：

1．用清水將電極杯進行沖洗

2. 用蒸餾水沖洗2-3次

3．向電極杯中加入75%酒精浸泡，置于燒杯或其他器皿中待用（若兩周后仍無試驗需要，則需隔兩周對電極杯進行以上清洗過程）

? 選擇合適的電轉(zhuǎn)緩沖液，盡量是低離子濃度緩沖液，減少對電擊參數(shù)的影響，以及避免爆杯。

樣品體積的建議區(qū)間50-80μl

若在電擊過程中出現(xiàn)爆杯或火花現(xiàn)象，原因有兩個：

1． 緩沖液中離子成分太高或電極杯清洗不干凈導(dǎo)致短路

2. 樣品體積太少，造成電流太大形成短路

相應(yīng)解決方法：盡量排除雜質(zhì)、增加樣品體積從而滿足試驗參數(shù)要求。