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美Agena 核酸質(zhì)譜分析系統(tǒng) MassARRAY

---全球**核酸質(zhì)譜高精度DNA定性定量分析平臺

技術(shù)特點：

本系統(tǒng)的突出特點是以極高的精確度和極快的速度，一次性掃描384個樣本中的多達(dá)40個SNP位點。首先進行多重PCR擴增，然后有經(jīng)過修飾的ddNTP作單堿基引物延伸，使質(zhì)譜能夠準(zhǔn)確識別堿基，并依據(jù)峰面積報告每個堿基的頻率。因此能夠準(zhǔn)確分析樣本中的等位基因分布頻率，適用于遺傳性疾病檢測和體細(xì)胞突變檢測以及鑒別一個體的正?；蚰[瘤組織。MassARRAY 反應(yīng)體系不需要雜交，可避免雜交錯配干擾，也不需要熒光標(biāo)記。其采用的高密度SpectroCHIP 芯片能在8小時內(nèi)完成3840個樣本的多重SNP鑒定，全自動分析結(jié)果，不受人為因素干擾。訪系統(tǒng)分為96孔和384孔2種不同通量和3種儀器型號供用戶靈活選擇，可滿足用戶低，中，高不同通量的使用需求。該系統(tǒng)的上市及時提供了從低到高不同規(guī)模的高效率和高質(zhì)量檢測SNP的技術(shù)平臺，順應(yīng)了當(dāng)前醫(yī)學(xué)疾病基因組疾病機制研究和臨床診斷檢測迅猛發(fā)展的趨勢。

技術(shù)原理

核酸質(zhì)譜主要通過單堿基延伸和分子切割的兩種生物化學(xué)技術(shù)實現(xiàn)。

iPLEX SNP 基因型分析

Assay Designer 軟件對SNP的80-150bp區(qū)域設(shè)計多重PCR引物，并對SNP位點設(shè)計單堿基延伸引物。PCR擴增處理：5ul體系做1-40重反應(yīng)，45個循環(huán)；產(chǎn)物經(jīng)蝦堿性磷酸酶（SAP)處理。單堿基延伸擴增不同長度的1-40條引物，用ddNTP作用堿基延伸，200個循環(huán)。DNA質(zhì)譜檢測和數(shù)據(jù)分析精確區(qū)分4種堿基的分子量，并自動報告其生物結(jié)果。

EpiTYPER DNA 甲基化分析

亞硫酸鹽將未甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏?，PCR擴增和SAP處理用反鏈5端帶T7啟動的引物擴增500bp， 產(chǎn)物經(jīng)蝦堿性磷酸酶（SAP)處理，體外轉(zhuǎn)錄將DNA轉(zhuǎn)錄為PRA， 堿基特異性酶切酶切T后， DNA 片段的分子量取決于亞硫酸鹽處理后的堿基變化。